د GMO فصل استخراج او د توزیع کټ

په ځانګړي توګه د GMO فصل استخراج او ټرانسجینک PCR کشف لپاره مناسب.

د GMO فصل استخراج او پراخولو کټ په ځانګړي ډول د GMO فصلونو PCR کشف لپاره رامینځته شوی. د لیزس ځانګړی بفر چې د کټ په A برخه کې شتون لري کولی شي په ځانګړي ډول د اصلي فصلونو - غنم ، جوار ، وریجې ، پنبې او سویابین نسجونه لیز کړي ، ترڅو اړوند اجزا لکه نیوکلیک اسیدونه او پروټین خوشې کړي. د فینول/کلوروفارم استخراج د ځانګړي RNase سره یوځای کولی شي د لوړ پاکوالي جینومیک DNA پاک کړي پرته له کوم عیبونو لکه RNA ، پروټین او فلزي آئنونو سره. پاک شوی DNA په راتلونکي PCR کشف کې پلي کیدی شي. د کټ برخه B د دوه برخې ساده PCR عکس العمل سیسټم دی چې 2 × GMO PCR بفر او GMO DNA پولیمریز لري. د GMO DNA پولیمریز یو د تودوخې وړ پولیمریز دی چې د انټي باډیز سره تعدیل شوی. د 2 × GMO PCR بفر مختلف اجزا لري لکه MgCl₂، dNTPs ، د PCR عکس العمل ثبات کونکی ، اصلاح کونکی او وده کونکی د 2 × GMO غلظت کې. دا د ګړندي او ساده عملیاتو ګټې لري ، لوړ حساسیت ، قوي مشخصیت ، ښه ثبات ، او نور دا د GMO فصل ټرانسجینک PCR کشف لپاره د A برخې سره ترکیب کې کارول کیدی شي.

بلی. نه	د بسته کولو اندازه
4992905	200 rxn

موږ ته بریښنالیک واستوئ

د محصول تفصیل

تجرباتي بېلګه

پرله پسې پوښتنې

د محصول ټګونه

برخی

applic پراخه تطبیق: دا کټ کولی شي د پنځه لوی GMO فصلونو څخه د لوړ کیفیت جینومیک DNA راوباسي.
■ ساده او ګړندی: د GMO فصل جینومیک DNA استخراج په 2 ساعتونو کې بشپړ کیدی شي. د لوی یخچال لرونکي سینټریفوژونو ته اړتیا نشته ، د وسایلو او تجهیزاتو لپاره ټیټ اړتیاوې. د څیړنې موسسو په ټولو کچو کې د GMO فصلونو ګړندي جینومیک DNA استخراج لپاره مناسب.
■ لوړ موثریت او مشخصیت: د انټي باډي ترمیم شوي تاک پولیمریز ځانګړی بفر د مؤثره پولیمریز امپلیفیشن تضمین کوي ، کوم چې د نورمال تاک پولیمریز څخه ډیر مشخص دی.

غوښتنلیکونه

کټ کولی شي د لوی GMO فصلونو لکه غنم ، جوار ، وريجو ، پنبې او سویابین څخه د لوړ کیفیت جینومیک DNA راوباسي ، او د GMO فصلونو کې د PCR ټرانسجینک کشف ترسره کړي.

ټول محصولات د ODM/OEM لپاره تنظیم کیدی شي. د جزیاتو لپاره ،مهرباني وکړئ کلیک شوی خدمت (ODM/OEM) کلیک وکړئ

مخکینی: د فاسټ کینګ یو ګام RT-qPCR کټ (پروب)

بل: د TIANcombi DNA Lyse & Det PCR Kit

د جینومیک DNA استخراج
د جینومیک DNA استخراج په ترتیب سره د وريجو ، جوارو ، سویابین ، پنبې او غنمو په 100 ملی ګرامه پا leavesو کې ترسره شوی. تجربه دوه ځله تکرار شوه. د ټول 100 μl بریښنا څخه 3 μl DNA په هر لین کې بار شوی و.
د اګاروز جیل غلظت 2٪ و. الیکټروفورسیس د 20 دقیقو لپاره د 6 V/cm لاندې ترسره شوی.
D15000: TIANGEN D15000 DNA مارکر.

د PCR کشف
د وریجو ، جوار ، سویابین ، پنبې او غنمو جینومیک DNA په ترتیب سره پراخه شوي. تجربه دوه ځله تکرار شوه. د ټول 20 μl عکس العمل سیسټم څخه 6 μl په هر لین کې بار شوی و.
د اګاروز جیل غلظت 2٪ و. الیکټروفورسیس د 20 دقیقو لپاره د 6 V/cm لاندې ترسره شوی.
D15000: TIANGEN D15000 DNA مارکر.

پوښتنه: د پراخولو بندونه نشته

A-1 کينډۍ

■ نمونه د پروټین ناپاکۍ یا د تقطیر مخنیوي ، او نور لري. DNA د DNA نمونه پاک کړئ ، د پروټین ناپاکۍ لرې کړئ یا د پاکولو کټونو سره د DNA نمونه راوباسئ.

template د سانچې ډیناتوریشن بشپړ ندی —— په مناسب ډول د ډیناتوریشن تودوخه لوړه کړئ او د ډیینټریشن وخت اوږد کړئ.

■ د کينډۍ تخريب the کينډۍ بيا چمتو کړئ.

A-2 پریمر

د پریمر ضعیف کیفیت-د پریمر بیا ترکیب.

■ د پریمر تخریب —— د لوړ غلظت لرونکي پریمر د ساتنې لپاره کوچني حجم ته جلا کړئ. د ډیری یخیدو او ژړیدو یا اوږدمهاله 4 ° C کریوپریزر څخه مخنیوی وکړئ.

pri د پریمرونو ناسم ډیزاین (د مثال په توګه د پریمر اوږدوالی کافي ندي ، د پریمرونو ترمینځ رامینځته شوی ډیمر ، او نور) -د ډیزاین پریمرونه (د پریمر ډیمر او ثانوي جوړښت رامینځته کیدو څخه مخنیوی وکړئ)

A-3 Mg²⁺تمرکز

■ Mg²⁺ تمرکز خورا ټیټ دی - په مناسب ډول Mg ته وده ورکول²⁺تمرکز: Mg غوره کړئ²⁺ د اعظمي Mg ټاکلو لپاره د 0.5 ملي میتر وقفې سره له 1 ملي میتر څخه تر 3 ملي میتر پورې د عکس العملونو لړۍ لخوا تمرکز²⁺ د هر ټیمپلیټ او پریمر لپاره تمرکز.

A-4 دحرارت درجه

an د لوړ انیلینګ تودوخه د پریمر او ټیمپلیټ پابندۍ اغیزه کوي. د انیلینګ تودوخې کم کړئ او د 2 ° C درجې سره حالت مطلوب کړئ.

A-5 د تمدید وخت

extension د تمدید لنډ وخت extension د تمدید وخت زیات کړئ.

پوښتنه: غلط مثبت

فینومینا: منفي نمونې د هدف ترتیب بډونه هم ښیې.

د PCR A-1 ککړتیا

target د هدف ترتیب یا پراخولو محصولاتو کراس ککړتیا are په احتیاط سره په منفي نمونه کې د هدف ترتیب لرونکي نمونه پایپټ نه کړئ یا د سنټرفیج ټیوب څخه یې وغورځوئ. ریجنټونه یا تجهیزات باید د موجود نیوکلیک اسیدونو له مینځه وړو لپاره اتوماتیک شي ، او د ککړتیا شتون باید د منفي کنټرول تجربو له لارې وټاکل شي.

■ د ریجینټ ککړتیا the د ریجینټونو جلا کول او په ټیټ تودوخې کې ذخیره کول.

A-2 اعظمr

■ Mg²⁺ تمرکز خورا ټیټ دی - په مناسب ډول Mg ته وده ورکول²⁺ تمرکز: Mg غوره کړئ²⁺ د اعظمي Mg ټاکلو لپاره د 0.5 ملي میتر وقفې سره له 1 ملي میتر څخه تر 3 ملي میتر پورې د عکس العملونو لړۍ لخوا تمرکز²⁺ د هر ټیمپلیټ او پریمر لپاره تمرکز.

■ د پریمر نامناسب ډیزاین ، او د هدف ترتیب د غیر هدف شوي ترتیب سره هومولوژي لري. د بیا ډیزاین پریمرونه.

پوښتنه: غیر مشخص توسعه

فینومینا: د PCR امپلیفیکیشن بینډونه د متوقع اندازې سره متناقض دي ، یا لوی یا کوچني ، یا ځینې وختونه دواړه ځانګړي امپلیفیکیشن بینډونه او غیر ځانګړي امپلیفیکیشن بینډونه واقع کیږي.

A-1 پریمر

pri د پریمر ضعیف مشخصات

د بیا ډیزاین پریمر.

■ د پریمر غلظت خورا لوړ دی ro په مناسب ډول د ډیناتوریشن تودوخه ډیروي او د ډیینټریشن وخت اوږدوي.

A-2 Mg²⁺ تمرکز

Mg د Mg²⁺ تمرکز خورا لوړ دی - په مناسب ډول د Mg2+ غلظت کم کړئ: Mg غوره کړئ²⁺ د اعظمي Mg ټاکلو لپاره د 0.5 ملي میتر وقفې سره له 1 ملي میتر څخه تر 3 ملي میتر پورې د عکس العملونو لړۍ لخوا تمرکز²⁺ د هر ټیمپلیټ او پریمر لپاره تمرکز.

A-3 د تودوخې وړ پولیمریز

en د انزایم ډیر مقدار - د انزیم مقدار په مناسب ډول د 0.5 U په وقفو کې کم کړئ.

A-4 دحرارت درجه

■ د انیلینګ تودوخه خورا ټیټه ده —— په مناسب ډول د انیلینګ تودوخه لوړه کړئ یا د دوه مرحلو انیلینګ میتود غوره کړئ

د A-5 PCR دورې

د PCR ډیری دورې - د PCR دورو شمیر کم کړئ.

پوښتنه: پیچ یا سمیر بډونه

A-1 پریمرoor ضعیف مشخصیت-د پریمر بیا ډیزاین کول ، د پریمر موقعیت او اوږدوالی بدل کړئ ترڅو د دې مشخصیت لوړ کړي یا ځړول شوی PCR ترسره کړئ.

A-2 کينډۍ DNA

- دا سانچه خالص نده - سانچه پاک کړئ یا د پاکولو کټونو سره DNA راوباسئ.

A-3 Mg²⁺ تمرکز

—— ایم جی²⁺ تمرکز خورا لوړ دی - په مناسب ډول Mg کم کړئ²⁺ تمرکز: Mg غوره کړئ²⁺ د اعظمي Mg ټاکلو لپاره د 0.5 ملي میتر وقفې سره له 1 ملي میتر څخه تر 3 ملي میتر پورې د عکس العملونو لړۍ لخوا تمرکز²⁺ د هر ټیمپلیټ او پریمر لپاره تمرکز.

A-4 dNTP

د DNTPs غلظت خورا لوړ دی - د DNTP غلظت په مناسب ډول کم کړئ

A-5 دحرارت درجه

ooد ټیټ انیلینګ تودوخه —— په مناسب ډول د انیلینګ تودوخه لوړه کړئ

A-6 دورې

- ډیری دورې - د دورې شمیره غوره کړئ

پوښتنه: د 50 PCl PCR غبرګون سیسټم کې څومره نمونه DNA باید اضافه شي؟

پوښتنه: اوږده ټوټې څنګه پراخه کړو؟

لومړی ګام د مناسب پولیمریز غوره کول دي. منظم د تاک پولیمریز د 3'-5 'ایکسونوکلیز فعالیت نشتوالي له امله ثبوت نشي لوستلی ، او ناسم میتود به د ټوټو غزولو موثریت خورا راکم کړي. له همدې امله ، د تق تق پولیمریز نشي کولی په مؤثره توګه د 5 kb څخه لوی هدف ټوټې پراخه کړي. د ځانګړي ترمیم یا نورو لوړ وفادارۍ پولیمریز سره د تق پولیمریز باید د توسعې موثریت ښه کولو او د اوږدې ټوټې امپلیفیکیشن اړتیاو پوره کولو لپاره وټاکل شي. سربیره پردې ، د اوږدو ټوټو پراخول هم د پریمر ډیزاین ورته تنظیم کولو ته اړتیا لري ، د توزیع وخت ، د توسیع وخت ، د بفر pH ، او نور معمولا ، د 18-24 bp سره پریمر کولی شي غوره حاصل لامل شي. د ټیمپلیټ زیانونو مخنیوي لپاره ، په 94 ° C کې د تخفیف وخت باید په یوه دوره کې 30 ثانیو یا لږ ته راکم شي ، او د تودوخې درجه 94 ° C ته لوړیدو دمخه باید د 1 دقیقې څخه کم وي. سربیره پردې ، د تودوخې تودوخې شاوخوا 68 ° C کې تنظیم کول او د 1 kb/min نرخ سره د توسعې وخت ډیزاین کول کولی شي د اوږدو ټوټو مؤثره وده یقیني کړي.

پوښتنه: څنګه د PCR پراخولو وفادارۍ ته وده ورکړو؟

د PCR پراخېدو د غلطۍ کچه د لوړ وفادارۍ سره د مختلف DNA پولیمیراسونو په کارولو سره کم کیدی شي. تر دې دمه د موندل شوي ټولو تاک DNA پولیمیرسونو کې ، Pfu انزیم د خطا ټیټه کچه او ترټولو لوړ وفاداري لري (ضمیمه شوی جدول وګورئ). د انزیم انتخاب سربیره ، څیړونکي کولی شي د عکس العمل شرایطو مطلوب کولو سره د PCR تغیر کچه نوره هم راکمه کړي ، پشمول د بفر ترکیب مطلوب کول ، د ترموستایبل پولیمریز غلظت او د PCR دورې شمیره مطلوب کول.

خپل پیغام دلته ولیکئ او موږ ته یې واستوئ