amp د لوړولو موثریت: د مختلف اندازو DNA ټوټې (له 5 kb څخه ټیټ) او سرچینې په مؤثره توګه پراخه کیدی شي.
sensitivity لوړ حساسیت: د هدف ټوټې تر 10 pg پورې ټیټې کیدی شي د جینومیک ټیمپلیټونو څخه پراخه شي.
stress د لوړ فشار مقاومت: د لوړ ناپاک مینځپانګو سره د نمونو لپاره لکه خام ایستل شوي ټیمپلیټ/باکتریا کلتور ، د هدف ټوټه په اسانۍ سره پراخه کیدی شي. د پولیمریز فعالیت به د بار بار یخیدو او خړوبیدو سره اغیزمن نشي.
applications د غوښتنلیکونو لپاره مناسب: د عکس العمل سیسټم په اسانۍ او ګړندي چمتو شوی و. پراخه شوې ټوټه د 3 پای DA-overhang لري ، کوم چې د TA کلونینګ لپاره مناسب دی.
ډول: د تق DNA پولیمریز
نمونه: پاک/ناخالصه ایستل شوې نمونه/باکتریایی کلتور
کينډۍ: > 10 مخ
د ټوټې اندازه: <5 kb
غوښتنلیکونه: د DNA ټوټو د PCR پراخول ، د DNA لیبل کول ، د پریمر توسیع ، د ترتیب ټاکنه ، د لوی کچې جین کشف کول ، د PCR نیمه کمیتي تجربې ، د ټریس DNA کشف کول ، او نور.
ټول محصولات د ODM/OEM لپاره تنظیم کیدی شي. د جزیاتو لپاره ،مهرباني وکړئ کلیک شوی خدمت (ODM/OEM) کلیک وکړئ
شکل 1. د مختلف سرچینو څخه نمونې د ترتیب کونکي TR لخوا په ترتیب سره د TIANGEN طاق ماسټر مکس II او عام تق مکس لخوا پراخه شوي ترڅو د ریجینټس فشار مقاومت ومومي. پایلې ښیې چې د TIANGEN محصولات کولی شي د خام جینومیک ټیمپلیټونو او باکتریا کلتور څخه د هدف ټوټې پراخه کړي ، او د فشار مقاومت د عرضه کونکي TR څخه غوره دی. A: خام جینومیک ټیمپلیټ د TIANGEN TIANcombi DNA Lyse & Det PCR Kit لخوا استخراج شوي. PRP/DN: د انسان د وینې نمونو خام استخراج او کشف. وريجې: د وريجو نمونو خام استخراج او کشف. ب: کالونی PCR. د PCR ټوټه 700 bp ده. M: د تیانګین مارکر III |
|
د مختلف سرچینو او مختلف اوږدوالي سره د ټیمپلیټونو لپاره ښه نړیوالتوب شکل 2. د بیلابیل سرچینو او طولونو ټوټې د TIANGEN په کارولو سره پراخه شوي تق ماسټر مکس II (A) او عادي تق د عرضه کونکي TK (B) ، عرضه کونکي TR (C) ، عرضه کونکي V (D) او عرضه کونکي G (E) په ترتیب سره ترکیب. پایلې ښیې چې د TIANGEN محصولاتو هراړخیز فعالیت د لوړولو وړتیا ، ځانګړتیا او نړیوالتوب له مخې غوره دی. 2-3: د وریجو جینومیک DNA ټیمپلیټ (694 bp ، 2258 bp) 4: د کاټن جینومیک DNA ټیمپلیټ (200 bp) 5: ایسچریچیا کولی د جینومیک DNA ټیمپلیټ (2298 bp) 6-7: د موږک جینوم DNA ټیمپلیټ (1 kb ، 2 kb) 8-10: د موږک جینومیک DNA ټیمپلیټ (1 kb ، 2 kb ، 2080 bp) 11-18: د انسان جینوم DNA ټیمپلیټ (300 bp ، 448 bp (GC:: 74.8)) ، 1100 bp ، 750 bp ، 1000 bp ، 1090 bp (GC:: 70.4)) ، 2 kb ، 4 kb) |
|
لوړ حساسیت شکل 3. د موږک او د انسان DNA ټوټو مختلف تمرکز د TIANGEN په کارولو سره پراخه شوي تق ماسټر مکس II (A) ، عادي تق د عرضه کونکي V (B) او عرضه کونکي TK (C) ترکیب ، په ترتیب سره ، د پراخیدو حساسیت کشف کولو لپاره. پایلې ښیې چې د TIANGEN محصول کولی شي د جینوم ټیمپلیټ څخه د هدف ټوټه تر 0.01 ng پورې پراخه کړي ، او د دې حساسیت د عرضه کونکي V او TK.M څخه محصولاتو په پرتله غوره دی: TIANGEN مارکر III ، N: NTCT انډول 1-8 : 200 ng ، 100 ng ، 50 ng ، 20 ng ، 10 ng ، 1 ng ، 0.1 ng ، 0.01 ng. |
A-1 کينډۍ
■ نمونه د پروټین ناپاکۍ یا د تقطیر مخنیوي ، او نور لري. DNA د DNA نمونه پاک کړئ ، د پروټین ناپاکۍ لرې کړئ یا د پاکولو کټونو سره د DNA نمونه راوباسئ.
template د سانچې ډیناتوریشن بشپړ ندی —— په مناسب ډول د ډیناتوریشن تودوخه لوړه کړئ او د ډیینټریشن وخت اوږد کړئ.
■ د کينډۍ تخريب the کينډۍ بيا چمتو کړئ.
A-2 پریمر
د پریمر ضعیف کیفیت-د پریمر بیا ترکیب.
■ د پریمر تخریب —— د لوړ غلظت لرونکي پریمر د ساتنې لپاره کوچني حجم ته جلا کړئ. د ډیری یخیدو او ژړیدو یا اوږدمهاله 4 ° C کریوپریزر څخه مخنیوی وکړئ.
pri د پریمرونو ناسم ډیزاین (د مثال په توګه د پریمر اوږدوالی کافي ندي ، د پریمرونو ترمینځ رامینځته شوی ډیمر ، او نور) -د ډیزاین پریمرونه (د پریمر ډیمر او ثانوي جوړښت رامینځته کیدو څخه مخنیوی وکړئ)
A-3 Mg2+تمرکز
■ Mg2+ تمرکز خورا ټیټ دی - په مناسب ډول Mg ته وده ورکول2+ تمرکز: Mg غوره کړئ2+ د اعظمي Mg ټاکلو لپاره د 0.5 ملي میتر وقفې سره له 1 ملي میتر څخه تر 3 ملي میتر پورې د عکس العملونو لړۍ لخوا تمرکز2+ د هر ټیمپلیټ او پریمر لپاره تمرکز.
A-4 دحرارت درجه
an د لوړ انیلینګ تودوخه د پریمر او ټیمپلیټ پابندۍ اغیزه کوي. د انیلینګ تودوخې کم کړئ او د 2 ° C درجې سره حالت مطلوب کړئ.
A-5 د تمدید وخت
extension د تمدید لنډ وخت extension د تمدید وخت زیات کړئ.
فینومینا: منفي نمونې د هدف ترتیب بډونه هم ښیې.
د PCR A-1 ککړتیا
target د هدف ترتیب یا پراخولو محصولاتو کراس ککړتیا are په احتیاط سره په منفي نمونه کې د هدف ترتیب لرونکي نمونه پایپټ نه کړئ یا د سنټرفیج ټیوب څخه یې وغورځوئ. ریجنټونه یا تجهیزات باید د موجود نیوکلیک اسیدونو له مینځه وړو لپاره اتوماتیک شي ، او د ککړتیا شتون باید د منفي کنټرول تجربو له لارې وټاکل شي.
■ د ریجینټ ککړتیا the د ریجینټونو جلا کول او په ټیټ تودوخې کې ذخیره کول.
A-2 اعظمr
■ Mg2+ تمرکز خورا ټیټ دی - په مناسب ډول Mg ته وده ورکول2+ تمرکز: Mg غوره کړئ2+ د اعظمي Mg ټاکلو لپاره د 0.5 ملي میتر وقفې سره له 1 ملي میتر څخه تر 3 ملي میتر پورې د عکس العملونو لړۍ لخوا تمرکز2+ د هر ټیمپلیټ او پریمر لپاره تمرکز.
■ د پریمر نامناسب ډیزاین ، او د هدف ترتیب د غیر هدف شوي ترتیب سره هومولوژي لري. د بیا ډیزاین پریمرونه.
فینومینا: د PCR امپلیفیکیشن بینډونه د متوقع اندازې سره متناقض دي ، یا لوی یا کوچني ، یا ځینې وختونه دواړه ځانګړي امپلیفیکیشن بینډونه او غیر ځانګړي امپلیفیکیشن بینډونه واقع کیږي.
A-1 پریمر
pri د پریمر ضعیف مشخصات
د بیا ډیزاین پریمر.
■ د پریمر غلظت خورا لوړ دی ro په مناسب ډول د ډیناتوریشن تودوخه ډیروي او د ډیینټریشن وخت اوږدوي.
A-2 Mg2+ تمرکز
Mg د Mg2+ تمرکز خورا لوړ دی - په مناسب ډول د Mg2+ غلظت کم کړئ: Mg غوره کړئ2+ د اعظمي Mg ټاکلو لپاره د 0.5 ملي میتر وقفې سره له 1 ملي میتر څخه تر 3 ملي میتر پورې د عکس العملونو لړۍ لخوا تمرکز2+ د هر ټیمپلیټ او پریمر لپاره تمرکز.
A-3 د تودوخې وړ پولیمریز
en د انزایم ډیر مقدار - د انزیم مقدار په مناسب ډول د 0.5 U په وقفو کې کم کړئ.
A-4 دحرارت درجه
■ د انیلینګ تودوخه خورا ټیټه ده —— په مناسب ډول د انیلینګ تودوخه لوړه کړئ یا د دوه مرحلو انیلینګ میتود غوره کړئ
د A-5 PCR دورې
د PCR ډیری دورې - د PCR دورو شمیر کم کړئ.
A-1 پریمرoor ضعیف مشخصیت-د پریمر بیا ډیزاین کول ، د پریمر موقعیت او اوږدوالی بدل کړئ ترڅو د دې مشخصیت لوړ کړي یا ځړول شوی PCR ترسره کړئ.
A-2 کينډۍ DNA
- دا سانچه خالص نده - سانچه پاک کړئ یا د پاکولو کټونو سره DNA راوباسئ.
A-3 Mg2+ تمرکز
—— ایم جی2+ تمرکز خورا لوړ دی - په مناسب ډول Mg کم کړئ2+ تمرکز: Mg غوره کړئ2+ د اعظمي Mg ټاکلو لپاره د 0.5 ملي میتر وقفې سره له 1 ملي میتر څخه تر 3 ملي میتر پورې د عکس العملونو لړۍ لخوا تمرکز2+ د هر ټیمپلیټ او پریمر لپاره تمرکز.
A-4 dNTP
د DNTPs غلظت خورا لوړ دی - د DNTP غلظت په مناسب ډول کم کړئ
A-5 دحرارت درجه
ooد ټیټ انیلینګ تودوخه —— په مناسب ډول د انیلینګ تودوخه لوړه کړئ
A-6 دورې
- ډیری دورې - د دورې شمیره غوره کړئ
لومړی ګام د مناسب پولیمریز غوره کول دي. منظم د تاک پولیمریز د 3'-5 'ایکسونوکلیز فعالیت نشتوالي له امله ثبوت نشي لوستلی ، او ناسم میتود به د ټوټو غزولو موثریت خورا راکم کړي. له همدې امله ، د تق تق پولیمریز نشي کولی په مؤثره توګه د 5 kb څخه لوی هدف ټوټې پراخه کړي. د ځانګړي ترمیم یا نورو لوړ وفادارۍ پولیمریز سره د تق پولیمریز باید د توسعې موثریت ښه کولو او د اوږدې ټوټې امپلیفیکیشن اړتیاو پوره کولو لپاره وټاکل شي. سربیره پردې ، د اوږدو ټوټو پراخول هم د پریمر ډیزاین ورته تنظیم کولو ته اړتیا لري ، د توزیع وخت ، د توسیع وخت ، د بفر pH ، او نور معمولا ، د 18-24 bp سره پریمر کولی شي غوره حاصل لامل شي. د ټیمپلیټ زیانونو مخنیوي لپاره ، په 94 ° C کې د تخفیف وخت باید په یوه دوره کې 30 ثانیو یا لږ ته راکم شي ، او د تودوخې درجه 94 ° C ته لوړیدو دمخه باید د 1 دقیقې څخه کم وي. سربیره پردې ، د تودوخې تودوخې شاوخوا 68 ° C کې تنظیم کول او د 1 kb/min نرخ سره د توسعې وخت ډیزاین کول کولی شي د اوږدو ټوټو مؤثره وده یقیني کړي.
د PCR پراخېدو د غلطۍ کچه د لوړ وفادارۍ سره د مختلف DNA پولیمیراسونو په کارولو سره کم کیدی شي. تر دې دمه د موندل شوي ټولو تاک DNA پولیمیرسونو کې ، Pfu انزیم د خطا ټیټه کچه او ترټولو لوړ وفاداري لري (ضمیمه شوی جدول وګورئ). د انزیم انتخاب سربیره ، څیړونکي کولی شي د عکس العمل شرایطو مطلوب کولو سره د PCR تغیر کچه نوره هم راکمه کړي ، پشمول د بفر ترکیب مطلوب کول ، د ترموستایبل پولیمریز غلظت او د PCR دورې شمیره مطلوب کول.
د دې له تاسیس راهیسې ، زموږ فابریکه د اصولو په مراعتولو سره د نړۍ لومړۍ درجې محصولاتو ته وده ورکوي
لومړی کیفیت. زموږ محصولاتو په صنعت کې عالي شهرت ترلاسه کړی او د نوي او زړو پیرودونکو ترمینځ ارزښت لرونکي اعتماد.