د سرو زرو اسانه PCR سیسټم (د رنګ سره)

د دوه برخو ساده PCR غبرګون سیسټم.

بلی. نه د بسته کولو اندازه
4993003 250 U (2.5 U/μl)
4993004 500 U (2.5 U/μl)

د محصول تفصیل

تجرباتي بېلګه

پرله پسې پوښتنې

د محصول ټګونه

برخی

■ ښه ثبات: ځانګړی فورمول د عکس العمل ټول سیسټم خورا مستحکم کوي. سیسټم د PCR اغیزمن توب لپاره اړین اجزا لري ، لکه د ترموستایبل DNA پولیمریز ، dNTPs ، MgCl2 او د بفر حل ، په بیله بیا یو شمیر ځانګړي ثبات کونکي ، کوم چې په نورمال تودوخې او 4 at کې د پولیمریز او dNTP ثبات خورا ډیر کوي.
■ ګړندی او ساده: ساده او ګړندی عملیات. په ساده ډول دوه برخې په تناسب کې ګډ کړئ او بیا د عکس العمل تنظیم کولو لپاره ټیمپلیټونه او پریمرونه اضافه کړئ ، د PCR عکس العمل مختلف برخو اضافه کولو ستړي مرحلو څخه مخنیوی وکړئ. د نمونې اخیستنې غلطۍ او کراس ککړتیا کم کړئ ، د مختلف بیچونو ترمینځ لږې غلطۍ سره ، او په نیمه کمیتي تجربو کې کارول کیدی شي.
application پراخه غوښتنلیک او لوړ حساسیت.
reaction د هر عکس العمل سیسټم رنګونه لري ، او الیکټروفورسیس مستقیم د PCR مرحلو وروسته ترسره کیدی شي ترڅو پروسیژر ګړندی او د کار سپمونکی وي.

د کیفیت کنټرول

د SDS-PAGE پاکوالي له 99 than څخه ډیر دی د خارجي نیوکلیز هیڅ فعالیت ندی موندل شوی د انسان جینوم کې واحد جین په مؤثره توګه پراخه کیدی شي هیڅ د پام وړ فعالیت نه بدلیږي کله چې د یوې اونۍ لپاره د خونې تودوخې کې زیرمه شي.

ثبات

هغه محصول چې د دوه برخې ساده PCR سیسټم کاروي د څرګند فعالیت بدلون پرته د یوې میاشتې لپاره 4 ° C کې زیرمه کیدی شي.

کاري فلو

1 ګام: په تناسب کې مختلف اجزا مخلوط کړئ.

مرحله 2: سمدستي تجربه پیل کړئ.

مرحله 3: د رنګونو سره مخلوط لپاره مستقیم الیکټروفورسیس.

څلورم ګام: د قناعت وړ تجربوي پایلې.

Final Reaction Concentration:

ټول محصولات د ODM/OEM لپاره تنظیم کیدی شي. د جزیاتو لپاره ،مهرباني وکړئ کلیک شوی خدمت (ODM/OEM) کلیک وکړئ


  • مخکینی:
  • بل:

  • product_certificate04 product_certificate01 product_certificate03 product_certificate02
    ×
    Experimental Example د دوه برخو ساده PCR سیسټم (د سرو زرو اسانه PCR سیسټم) پلي کیږي. د عکس العمل سیسټم 50 μl دی (که د عکس العمل سیسټمونه مختلف وي ، مهرباني وکړئ دې سیسټم ته په اشارې د عکس العمل اجزاو مقدار په تناسب زیات یا کم کړئ).
    Experimental Example د غبرګون وروستی تمرکز
    پوښتنه: د پراخولو بندونه نشته

    A-1 کينډۍ

    ■ نمونه د پروټین ناپاکۍ یا د تقطیر مخنیوي ، او نور لري. DNA د DNA نمونه پاک کړئ ، د پروټین ناپاکۍ لرې کړئ یا د پاکولو کټونو سره د DNA نمونه راوباسئ.

    template د سانچې ډیناتوریشن بشپړ ندی —— په مناسب ډول د ډیناتوریشن تودوخه لوړه کړئ او د ډیینټریشن وخت اوږد کړئ.

    ■ د کينډۍ تخريب the کينډۍ بيا چمتو کړئ.

    A-2 پریمر

    د پریمر ضعیف کیفیت-د پریمر بیا ترکیب.

    ■ د پریمر تخریب —— د لوړ غلظت لرونکي پریمر د ساتنې لپاره کوچني حجم ته جلا کړئ. د ډیری یخیدو او ژړیدو یا اوږدمهاله 4 ° C کریوپریزر څخه مخنیوی وکړئ.

    pri د پریمرونو ناسم ډیزاین (د مثال په توګه د پریمر اوږدوالی کافي ندي ، د پریمرونو ترمینځ رامینځته شوی ډیمر ، او نور) -د ډیزاین پریمرونه (د پریمر ډیمر او ثانوي جوړښت رامینځته کیدو څخه مخنیوی وکړئ)

    A-3 Mg2+تمرکز

    ■ Mg2+ تمرکز خورا ټیټ دی - په مناسب ډول Mg ته وده ورکول2+ تمرکز: Mg غوره کړئ2+ د اعظمي Mg ټاکلو لپاره د 0.5 ملي میتر وقفې سره له 1 ملي میتر څخه تر 3 ملي میتر پورې د عکس العملونو لړۍ لخوا تمرکز2+ د هر ټیمپلیټ او پریمر لپاره تمرکز.

    A-4 دحرارت درجه

    an د لوړ انیلینګ تودوخه د پریمر او ټیمپلیټ پابندۍ اغیزه کوي. د انیلینګ تودوخې کم کړئ او د 2 ° C درجې سره حالت مطلوب کړئ.

    A-5 د تمدید وخت

    extension د تمدید لنډ وخت extension د تمدید وخت زیات کړئ.

    پوښتنه: غلط مثبت

    فینومینا: منفي نمونې د هدف ترتیب بډونه هم ښیې.

    د PCR A-1 ککړتیا

    target د هدف ترتیب یا پراخولو محصولاتو کراس ککړتیا are په احتیاط سره په منفي نمونه کې د هدف ترتیب لرونکي نمونه پایپټ نه کړئ یا د سنټرفیج ټیوب څخه یې وغورځوئ. ریجنټونه یا تجهیزات باید د موجود نیوکلیک اسیدونو له مینځه وړو لپاره اتوماتیک شي ، او د ککړتیا شتون باید د منفي کنټرول تجربو له لارې وټاکل شي.

    ■ د ریجینټ ککړتیا the د ریجینټونو جلا کول او په ټیټ تودوخې کې ذخیره کول.

    A-2 اعظمr

    ■ Mg2+ تمرکز خورا ټیټ دی - په مناسب ډول Mg ته وده ورکول2+ تمرکز: Mg غوره کړئ2+ د اعظمي Mg ټاکلو لپاره د 0.5 ملي میتر وقفې سره له 1 ملي میتر څخه تر 3 ملي میتر پورې د عکس العملونو لړۍ لخوا تمرکز2+ د هر ټیمپلیټ او پریمر لپاره تمرکز.

    ■ د پریمر نامناسب ډیزاین ، او د هدف ترتیب د غیر هدف شوي ترتیب سره هومولوژي لري. د بیا ډیزاین پریمرونه.

    پوښتنه: غیر مشخص توسعه

    فینومینا: د PCR امپلیفیکیشن بینډونه د متوقع اندازې سره متناقض دي ، یا لوی یا کوچني ، یا ځینې وختونه دواړه ځانګړي امپلیفیکیشن بینډونه او غیر ځانګړي امپلیفیکیشن بینډونه واقع کیږي.

    A-1 پریمر

    pri د پریمر ضعیف مشخصات

    د بیا ډیزاین پریمر.

    ■ د پریمر غلظت خورا لوړ دی ro په مناسب ډول د ډیناتوریشن تودوخه ډیروي او د ډیینټریشن وخت اوږدوي.

    A-2 Mg2+ تمرکز

    Mg د Mg2+ تمرکز خورا لوړ دی - په مناسب ډول د Mg2+ غلظت کم کړئ: Mg غوره کړئ2+ د اعظمي Mg ټاکلو لپاره د 0.5 ملي میتر وقفې سره له 1 ملي میتر څخه تر 3 ملي میتر پورې د عکس العملونو لړۍ لخوا تمرکز2+ د هر ټیمپلیټ او پریمر لپاره تمرکز.

    A-3 د تودوخې وړ پولیمریز

    en د انزایم ډیر مقدار - د انزیم مقدار په مناسب ډول د 0.5 U په وقفو کې کم کړئ.

    A-4 دحرارت درجه

    ■ د انیلینګ تودوخه خورا ټیټه ده —— په مناسب ډول د انیلینګ تودوخه لوړه کړئ یا د دوه مرحلو انیلینګ میتود غوره کړئ

    د A-5 PCR دورې

    د PCR ډیری دورې - د PCR دورو شمیر کم کړئ.

    پوښتنه: پیچ یا سمیر بډونه

    A-1 پریمرoor ضعیف مشخصیت-د پریمر بیا ډیزاین کول ، د پریمر موقعیت او اوږدوالی بدل کړئ ترڅو د دې مشخصیت لوړ کړي یا ځړول شوی PCR ترسره کړئ.

    A-2 کينډۍ DNA

    - دا سانچه خالص نده - سانچه پاک کړئ یا د پاکولو کټونو سره DNA راوباسئ.

    A-3 Mg2+ تمرکز

    —— ایم جی2+ تمرکز خورا لوړ دی - په مناسب ډول Mg کم کړئ2+ تمرکز: Mg غوره کړئ2+ د اعظمي Mg ټاکلو لپاره د 0.5 ملي میتر وقفې سره له 1 ملي میتر څخه تر 3 ملي میتر پورې د عکس العملونو لړۍ لخوا تمرکز2+ د هر ټیمپلیټ او پریمر لپاره تمرکز.

    A-4 dNTP

    د DNTPs غلظت خورا لوړ دی - د DNTP غلظت په مناسب ډول کم کړئ

    A-5 دحرارت درجه

    ooد ټیټ انیلینګ تودوخه —— په مناسب ډول د انیلینګ تودوخه لوړه کړئ

    A-6 دورې

    - ډیری دورې - د دورې شمیره غوره کړئ

    پوښتنه: د 50 PCl PCR غبرګون سیسټم کې څومره نمونه DNA باید اضافه شي؟
    ytry
    پوښتنه: اوږده ټوټې څنګه پراخه کړو؟

    لومړی ګام د مناسب پولیمریز غوره کول دي. منظم د تاک پولیمریز د 3'-5 'ایکسونوکلیز فعالیت نشتوالي له امله ثبوت نشي لوستلی ، او ناسم میتود به د ټوټو غزولو موثریت خورا راکم کړي. له همدې امله ، د تق تق پولیمریز نشي کولی په مؤثره توګه د 5 kb څخه لوی هدف ټوټې پراخه کړي. د ځانګړي ترمیم یا نورو لوړ وفادارۍ پولیمریز سره د تق پولیمریز باید د توسعې موثریت ښه کولو او د اوږدې ټوټې امپلیفیکیشن اړتیاو پوره کولو لپاره وټاکل شي. سربیره پردې ، د اوږدو ټوټو پراخول هم د پریمر ډیزاین ورته تنظیم کولو ته اړتیا لري ، د توزیع وخت ، د توسیع وخت ، د بفر pH ، او نور معمولا ، د 18-24 bp سره پریمر کولی شي غوره حاصل لامل شي. د ټیمپلیټ زیانونو مخنیوي لپاره ، په 94 ° C کې د تخفیف وخت باید په یوه دوره کې 30 ثانیو یا لږ ته راکم شي ، او د تودوخې درجه 94 ° C ته لوړیدو دمخه باید د 1 دقیقې څخه کم وي. سربیره پردې ، د تودوخې تودوخې شاوخوا 68 ° C کې تنظیم کول او د 1 kb/min نرخ سره د توسعې وخت ډیزاین کول کولی شي د اوږدو ټوټو مؤثره وده یقیني کړي.

    پوښتنه: څنګه د PCR پراخولو وفادارۍ ته وده ورکړو؟

    د PCR پراخېدو د غلطۍ کچه د لوړ وفادارۍ سره د مختلف DNA پولیمیراسونو په کارولو سره کم کیدی شي. تر دې دمه د موندل شوي ټولو تاک DNA پولیمیرسونو کې ، Pfu انزیم د خطا ټیټه کچه او ترټولو لوړ وفاداري لري (ضمیمه شوی جدول وګورئ). د انزیم انتخاب سربیره ، څیړونکي کولی شي د عکس العمل شرایطو مطلوب کولو سره د PCR تغیر کچه نوره هم راکمه کړي ، پشمول د بفر ترکیب مطلوب کول ، د ترموستایبل پولیمریز غلظت او د PCR دورې شمیره مطلوب کول.

    خپل پیغام دلته ولیکئ او موږ ته یې واستوئ