د الټرا های فیدیلټي PCR کټ
برخی
operate د چلولو لپاره اسانه: دا کټ د 2 × پریمیکس په توګه چمتو کیږي ، او PCR په ساده ډول د ټیمپلیټونو او پریمرونو اضافه کولو سره ترسره کیدی شي.
لوړ وفاداري: وفاداري د تق پولیمریز څخه 50 ځله ده.
■ لوړ ځانګړتیا: د محصول مشخصیت ډاډمن کولو لپاره عالي ګرم پیل فعالیت.
■ ګړندی وده: د توسعې سرعت کولی شي 10-15 ثانیو/kb ته ورسیږي.
■ قوي توسعه: تر 20 kb پورې د DNA ټوټې پراخه کیدی شي.
applic پراخه تطبیق: کټ د PCR لوړونکی لري او د لوړ GC او پیچلي ټیمپلیټونو پراخولو لپاره مناسب دی.
مشخصات
ډول: لوړ مخلص DNA پولیمریز
د پراخولو سرعت: 10-15 ثانیه/kb
د ټوټې اندازه: <20kb
غوښتنلیکونه: د لوړ وفادارۍ PCR پراخول ، د جین کلونینګ ، د GC لوړ ټیمپلیټ پراخول ، د پیچلي جینومونو جین کلون کول ، د cDNA لوړ مخلص توب ، SNP کشف ، د سایټ ځانګړي تغیر ، او نور.
د مختلف نباتاتو نسجونو څخه د DNA استخراج حاصل:
یادونه: د DNA حاصل د نمونې ډولونو پورې اړه لري. ټول پورته توکي د داوطلبه پا leavesو څخه دي.
ټول محصولات د ODM/OEM لپاره تنظیم کیدی شي. د جزیاتو لپاره ،مهرباني وکړئ کلیک شوی خدمت (ODM/OEM) کلیک وکړئ
 |
د محصول مشخصیت ډاډمن کولو لپاره ګرم پیل شکل 1. الټرا های فای د تودوخې عالي فعالیت لري ترڅو د لوړولو محصولاتو مشخصیت ډاډمن کړي. د مالیکولر بیکنز میتود پلي شوی (ما او ال. ، مقعد بایوکیم ، 2006). |
 |
عالي عالي مخلص ، د تق پولیمریز څخه 50 ځله لوړ شکل 2. د الټرا های فای وفاداري د عام تاک پولیمریز څخه 50 ځله لوړه ده. د تق پولیمریز پولیمریز کولو وفاداري (پرته له اصلاحي فعالیت څخه) د حوالې په توګه کارول کیږي. |
 |
ګړندی وده او اوږده ټوټې په ګړندۍ توګه پراخه کیدی شي انځر. د اوږدې ټوټو لپاره ، د تکثیر وخت په مناسب ډول غزول کیدی شي. د 15 kb څخه ډیر ټوټو لپاره ، د سرعت سرعت تر 30 ثانیو/kb پورې کیدی شي. M: TIANGEN D15000 مارکر |
   |
قوي نړیوالتوب او لوړ ځانګړتیا ، د لوړې GC لوستلو لپاره اسانه او د مختلف سرچینو څخه اوږده ټوټې شکل 4. الټرا های فای لوړ ځانګړتیاوې لري ترڅو د مختلف ډولونو نمونو لپاره د بریالیتوب بریالیتوب کچه او د محصول مقدار ډاډمن کړي. الف د الټرا های فای پراخه کولو پایلې B. د عرضه کونکي K د های فای انزیم پراخه کولو پایلې C. د عرضه کونکي N د های فای انزیم پراخه کولو پایلې M: TIANGEN D15000 مارکر لین 1-5. د مختلف اوږدوالي سره د ټیمپلیټونو پراخه کولو پایلې: 1. 750 bp 2. 1 kb .. 2 kb 4. 4 kb 5. 6 kb لین 6. د لوړ GC ټیمپلیټ پراخه کولو پایله: 1915 bp (GC:: 70)) لین 7-11. د مختلف جینوم څخه د 2 kb ټیمپلیټونو پراخه کولو پایله: 7. چوپۍ .. وريجې؛ 9. غنم؛ 10. جوار؛ 11. باکتریا لین 12-14. د 8 kb اوږدې ټوټې پراخېدو پایله: 12. وريجې؛ 13. جوار |
A-1 کينډۍ
■ نمونه د پروټین ناپاکۍ یا د تقطیر مخنیوي ، او نور لري. DNA د DNA نمونه پاک کړئ ، د پروټین ناپاکۍ لرې کړئ یا د پاکولو کټونو سره د DNA نمونه راوباسئ.
template د سانچې ډیناتوریشن بشپړ ندی —— په مناسب ډول د ډیناتوریشن تودوخه لوړه کړئ او د ډیینټریشن وخت اوږد کړئ.
■ د کينډۍ تخريب the کينډۍ بيا چمتو کړئ.
A-2 پریمر
د پریمر ضعیف کیفیت-د پریمر بیا ترکیب.
■ د پریمر تخریب —— د لوړ غلظت لرونکي پریمر د ساتنې لپاره کوچني حجم ته جلا کړئ. د ډیری یخیدو او ژړیدو یا اوږدمهاله 4 ° C کریوپریزر څخه مخنیوی وکړئ.
pri د پریمرونو ناسم ډیزاین (د مثال په توګه د پریمر اوږدوالی کافي ندي ، د پریمرونو ترمینځ رامینځته شوی ډیمر ، او نور) -د ډیزاین پریمرونه (د پریمر ډیمر او ثانوي جوړښت رامینځته کیدو څخه مخنیوی وکړئ)
A-3 Mg2+تمرکز
■ Mg2+ تمرکز خورا ټیټ دی - په مناسب ډول Mg ته وده ورکول2+ تمرکز: Mg غوره کړئ2+ د اعظمي Mg ټاکلو لپاره د 0.5 ملي میتر وقفې سره له 1 ملي میتر څخه تر 3 ملي میتر پورې د عکس العملونو لړۍ لخوا تمرکز2+ د هر ټیمپلیټ او پریمر لپاره تمرکز.
A-4 دحرارت درجه
an د لوړ انیلینګ تودوخه د پریمر او ټیمپلیټ پابندۍ اغیزه کوي. د انیلینګ تودوخې کم کړئ او د 2 ° C درجې سره حالت مطلوب کړئ.
A-5 د تمدید وخت
extension د تمدید لنډ وخت extension د تمدید وخت زیات کړئ.
فینومینا: منفي نمونې د هدف ترتیب بډونه هم ښیې.
د PCR A-1 ککړتیا
target د هدف ترتیب یا پراخولو محصولاتو کراس ککړتیا are په احتیاط سره په منفي نمونه کې د هدف ترتیب لرونکي نمونه پایپټ نه کړئ یا د سنټرفیج ټیوب څخه یې وغورځوئ. ریجنټونه یا تجهیزات باید د موجود نیوکلیک اسیدونو له مینځه وړو لپاره اتوماتیک شي ، او د ککړتیا شتون باید د منفي کنټرول تجربو له لارې وټاکل شي.
■ د ریجینټ ککړتیا the د ریجینټونو جلا کول او په ټیټ تودوخې کې ذخیره کول.
A-2 اعظمr
■ Mg2+ تمرکز خورا ټیټ دی - په مناسب ډول Mg ته وده ورکول2+ تمرکز: Mg غوره کړئ2+ د اعظمي Mg ټاکلو لپاره د 0.5 ملي میتر وقفې سره له 1 ملي میتر څخه تر 3 ملي میتر پورې د عکس العملونو لړۍ لخوا تمرکز2+ د هر ټیمپلیټ او پریمر لپاره تمرکز.
■ د پریمر نامناسب ډیزاین ، او د هدف ترتیب د غیر هدف شوي ترتیب سره هومولوژي لري. د بیا ډیزاین پریمرونه.
فینومینا: د PCR امپلیفیکیشن بینډونه د متوقع اندازې سره متناقض دي ، یا لوی یا کوچني ، یا ځینې وختونه دواړه ځانګړي امپلیفیکیشن بینډونه او غیر ځانګړي امپلیفیکیشن بینډونه واقع کیږي.
A-1 پریمر
pri د پریمر ضعیف مشخصات
د بیا ډیزاین پریمر.
■ د پریمر غلظت خورا لوړ دی ro په مناسب ډول د ډیناتوریشن تودوخه ډیروي او د ډیینټریشن وخت اوږدوي.
A-2 Mg2+ تمرکز
Mg د Mg2+ تمرکز خورا لوړ دی - په مناسب ډول د Mg2+ غلظت کم کړئ: Mg غوره کړئ2+ د اعظمي Mg ټاکلو لپاره د 0.5 ملي میتر وقفې سره له 1 ملي میتر څخه تر 3 ملي میتر پورې د عکس العملونو لړۍ لخوا تمرکز2+ د هر ټیمپلیټ او پریمر لپاره تمرکز.
A-3 د تودوخې وړ پولیمریز
en د انزایم ډیر مقدار - د انزیم مقدار په مناسب ډول د 0.5 U په وقفو کې کم کړئ.
A-4 دحرارت درجه
■ د انیلینګ تودوخه خورا ټیټه ده —— په مناسب ډول د انیلینګ تودوخه لوړه کړئ یا د دوه مرحلو انیلینګ میتود غوره کړئ
د A-5 PCR دورې
د PCR ډیری دورې - د PCR دورو شمیر کم کړئ.
A-1 پریمرoor ضعیف مشخصیت-د پریمر بیا ډیزاین کول ، د پریمر موقعیت او اوږدوالی بدل کړئ ترڅو د دې مشخصیت لوړ کړي یا ځړول شوی PCR ترسره کړئ.
A-2 کينډۍ DNA
- دا سانچه خالص نده - سانچه پاک کړئ یا د پاکولو کټونو سره DNA راوباسئ.
A-3 Mg2+ تمرکز
—— ایم جی2+ تمرکز خورا لوړ دی - په مناسب ډول Mg کم کړئ2+ تمرکز: Mg غوره کړئ2+ د اعظمي Mg ټاکلو لپاره د 0.5 ملي میتر وقفې سره له 1 ملي میتر څخه تر 3 ملي میتر پورې د عکس العملونو لړۍ لخوا تمرکز2+ د هر ټیمپلیټ او پریمر لپاره تمرکز.
A-4 dNTP
د DNTPs غلظت خورا لوړ دی - د DNTP غلظت په مناسب ډول کم کړئ
A-5 دحرارت درجه
ooد ټیټ انیلینګ تودوخه —— په مناسب ډول د انیلینګ تودوخه لوړه کړئ
A-6 دورې
- ډیری دورې - د دورې شمیره غوره کړئ
لومړی ګام د مناسب پولیمریز غوره کول دي. منظم د تاک پولیمریز د 3'-5 'ایکسونوکلیز فعالیت نشتوالي له امله ثبوت نشي لوستلی ، او ناسم میتود به د ټوټو غزولو موثریت خورا راکم کړي. له همدې امله ، د تق تق پولیمریز نشي کولی په مؤثره توګه د 5 kb څخه لوی هدف ټوټې پراخه کړي. د ځانګړي ترمیم یا نورو لوړ وفادارۍ پولیمریز سره د تق پولیمریز باید د توسعې موثریت ښه کولو او د اوږدې ټوټې امپلیفیکیشن اړتیاو پوره کولو لپاره وټاکل شي. سربیره پردې ، د اوږدو ټوټو پراخول هم د پریمر ډیزاین ورته تنظیم کولو ته اړتیا لري ، د توزیع وخت ، د توسیع وخت ، د بفر pH ، او نور معمولا ، د 18-24 bp سره پریمر کولی شي غوره حاصل لامل شي. د ټیمپلیټ زیانونو مخنیوي لپاره ، په 94 ° C کې د تخفیف وخت باید په یوه دوره کې 30 ثانیو یا لږ ته راکم شي ، او د تودوخې درجه 94 ° C ته لوړیدو دمخه باید د 1 دقیقې څخه کم وي. سربیره پردې ، د تودوخې تودوخې شاوخوا 68 ° C کې تنظیم کول او د 1 kb/min نرخ سره د توسعې وخت ډیزاین کول کولی شي د اوږدو ټوټو مؤثره وده یقیني کړي.
د PCR پراخېدو د غلطۍ کچه د لوړ وفادارۍ سره د مختلف DNA پولیمیراسونو په کارولو سره کم کیدی شي. تر دې دمه د موندل شوي ټولو تاک DNA پولیمیرسونو کې ، Pfu انزیم د خطا ټیټه کچه او ترټولو لوړ وفاداري لري (ضمیمه شوی جدول وګورئ). د انزیم انتخاب سربیره ، څیړونکي کولی شي د عکس العمل شرایطو مطلوب کولو سره د PCR تغیر کچه نوره هم راکمه کړي ، پشمول د بفر ترکیب مطلوب کول ، د ترموستایبل پولیمریز غلظت او د PCR دورې شمیره مطلوب کول.
د محصولاتو کټګورۍ
ولې موږ غوره کوو
د دې له تاسیس راهیسې ، زموږ فابریکه د اصولو په مراعتولو سره د نړۍ لومړۍ درجې محصولاتو ته وده ورکوي
لومړی کیفیت. زموږ محصولاتو په صنعت کې عالي شهرت ترلاسه کړی او د نوي او زړو پیرودونکو ترمینځ ارزښت لرونکي اعتماد.
- تلیفون: +86 010-59822688
- ودانۍ 5 ، شمیره 86 ، شوانګینګ لویدیځ سړک ، د چینګپینګ ولسوالۍ ، بیجینګ.
- people@tiangen.com
